نئون ڪورونوايرس (SARS-Cov-2) نيوڪلڪ ايسڊ جي چڪاس کٽ
New Cاووروnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluمعدنياتscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】نئون ڪورونا وائرس (SARS-Cov-2) نيوڪليڪ ايسڊ ڊيٽيڪشن کٽ (فلوريسنٽ RT-PCR جاچ جو طريقو)
【Packaging specifications 】25 ٽيسٽ/ڪٽ
【Intended usعمر】
هي ڪٽ نيوڪليڪ ايسڊ جي نيوڪليڪ ايسڊ جي معيار جي سڃاڻپ لاءِ استعمال ڪئي ويندي آهي نيون ڪورون وائرس مان ناسوفرينجيل swabs، oropharyngeal (گلا) swabs، anterior nasal swabs، mid-turbinate swabs، nasal washs ۽ nasal aspirates انهن ماڻهن کان جن کي COVID19 جي شڪ ۾ آهي انهن جي صحت جي سار سنڀال. نئين ڪورونوايرس جي ORF1ab ۽ N جين جو پتو لڳائڻ مددگار تشخيص ۽ نئين ڪورونوايرس انفيڪشن جي ايپيڊميولوجي نگراني لاء استعمال ڪري سگهجي ٿو.
【Principles of the pراسdure 】
هي ڪٽ مخصوص TaqMan پروبس ۽ مخصوص پرائمر لاءِ ٺهيل آهي ناول ڪورونا وائرس (SARS-Cov-2) ORF1ab ۽ N جين جي ترتيبن لاءِ. PCR رد عمل جو حل 3 سيٽن تي مشتمل آهي مخصوص پرائمر ۽ فلورسنٽ پروبس جا مخصوص هدفن جي سڃاڻپ لاءِ، ۽ مخصوص پرائمر ۽ فلورسنٽ پروبس جو هڪ اضافي سيٽ استعمال ڪيو ويندو آهي کٽ جي اندروني معياري ڪنٽرول جي طور تي انڊوجينس هائوس ڪيپنگ جينز کي ڳولڻ لاءِ.
امتحان جو اصول اهو آهي ته مخصوص فلورسنٽ پروب کي پي سي آر جي رد عمل ۾ Taq اينزيم جي Exonuclease سرگرمي ذريعي هضم ۽ خراب ڪيو ويندو آهي، انهي ڪري ته رپورٽر فلورسنٽ گروپ ۽ quenched فلورسنٽ گروپ کي الڳ ڪيو ويو آهي، انهي ڪري ته فلورسنٽ مانيٽرنگ سسٽم هڪ فلورسنٽ حاصل ڪري سگهي ٿو. سگنل، ۽ پوءِ پي سي آر ايمپليفڪيشن جي افزودگي اثر جي ذريعي، جاچ جو فلورسنس سگنل هڪ مقرر حد تائين پهچي ٿو- Ct قدر (سائيڪل حد). ڪنهن به ٽارگيٽ ايمپليڪن جي صورت ۾، تحقيق جي رپورٽر گروپ quenching گروپ جي ويجهو آهي. هن وقت، فلوروسينس گونج توانائي جي منتقلي ٿئي ٿي، ۽ رپورٽر گروپ جي فلوروسينس کي quenching گروپ طرفان ختم ڪيو ويندو آهي، انهي ڪري ته فلورسنٽ سگنل فلورسنٽ پي سي آر اوزار طرفان ڳولي نه ٿو سگهجي.
ٽيسٽ دوران ريجينٽس جي استعمال جي نگراني ڪرڻ لاءِ، کٽ مثبت ۽ ناڪاري ڪنٽرول سان ليس آهي: مثبت ڪنٽرول ۾ ٽارگيٽ سائٽ recombinant پلاسميڊ شامل آهي، ۽ منفي ڪنٽرول ڊسٽل واٽر آهي، جيڪو ماحولياتي آلودگي جي نگراني ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي. اها سفارش ڪئي وئي آهي ته هڪ مثبت ڪنٽرول ۽ هڪ منفي ڪنٽرول هڪ ئي وقت ۾ جانچيو وڃي.
【Main comپونts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | ڪمپونents | |
| نالوe | اسپيڪٺاھڻ | مقدارity | مقدارity | |
| مثبت ڪنٽرول | 180 μL / شيشي | 1 | 1 | مصنوعي طور تي ٺهيل پلاسميڊ، ڊسٽل پاڻي |
| ناڪاري ڪنٽرول | 180 μL / شيشي | 1 | 1 | ڊسٽيل پاڻي |
| SARS-Cov-2 مکس | 358.5 μL/شيشي | 1 | / | مخصوص پرائمر جوڙو، مخصوص چڪاس فلورسنٽ پروبس، dNTPs، , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distilled water, etc |
| انزائم ملائي | 16.5 μL/شيشي | 1 | / | Taq enzymes, reverse transscriptase, UNG enzymes, etc. |
| SARS-Cov-2 مکس (Lyophilised) | 25 ٽيسٽ / شيشي | / | 1 | مخصوص پرائمر جوڙو، مخصوص چڪاس فلورسنٽ پروبس، ڊي اين ٽي پيز، ٽائيڪ اينزائمز، ريورس ٽرانسڪرپٽ، ڊسٽل واٽر وغيره. |
| 2x بفر | 375 μL / شيشي | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distilled water, etc. |
نوٽ:(1) مختلف بيچ ڪٽس ۾ اجزاء ملائي يا مٽائي نه سگھندا.
(2) پنهنجو پاڻ جو ريجنٽ تيار ڪريو: نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ واري کٽ.
【Storage condآئي ٽيons ۽ expiration date 】
For BST-SARS-25:هڪ ڊگهي وقت لاء -20 ± 5 ℃ تي ٽرانسپورٽ ۽ اسٽور.
For BST-SARS-DR-25:ڪمري جي حرارت تي ٽرانسپورٽ. اسٽوريج -20 ± 5 ℃ هڪ ڊگهي وقت لاء.
بار بار منجمد ٿيڻ واري چڪر کان پاسو ڪريو. صحيح مدت 12 مهينن لاء عارضي طور تي مقرر ڪئي وئي آهي.
پيداوار ۽ استعمال جي تاريخ لاء ليبل ڏسو.
پهرين کولڻ کان پوءِ، ريجينٽ کي ذخيرو ڪري سگهجي ٿو -20 ± 5 ° C تي 1 مهيني کان وڌيڪ نه يا ريجينٽ جي مدي جي پڄاڻي تائين، جيڪا به تاريخ پهرين اچي، بار بار منجمد ٿيڻ واري چڪر کان بچڻ لاءِ، ۽ ريجينٽ منجمد جو تعداد - thaw cycles 6 ڀيرا کان وڌيڪ نه هجڻ گهرجي.
【Applicable instrument】ABI 7500، SLAN-96P، Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable نموني جو قسم: ڪڍيو nucleic امل حل.
2. نمونو رکڻ ۽ نقل و حمل: 6 مھينن لاءِ-20±5℃ تي ذخيرو ڪريو. نمونن کي 6 ڀيرا کان وڌيڪ نه منجمد ڪريو ۽ ٿڪايو.
【Tاندازوing metهود】
1.Nucleic acid extraction
وائرل نيوڪلڪ ايسڊ ڪڍڻ لاءِ مناسب نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ واري کٽ چونڊيو، ۽ لاڳاپيل کٽ جي هدايتن تي عمل ڪريو. يڪسين بايو ٽيڪ (گوانگزو) ڪمپني لميٽيڊ پاران تيار ڪيل نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ واري کٽ استعمال ڪرڻ جي صلاح ڏني وئي آهي.
2. Reaction ريجnt prepآراtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 Mix ۽ Enzyme Mix کي هٽايو، مڪمل طور تي ڪمري جي گرمي پد تي مڪمل طور تي وورٽيڪس ڊيوائس ذريعي مکس ڪريو ۽ پوءِ ٿوري دير سان سينٽريفيوج ڪريو.
(2) 16.5uL Enzyme Mix کي 358.5uL SARS-Cov-2 Mix ۾ شامل ڪيو ويو ۽ مخلوط رد عمل جو حل حاصل ڪرڻ لاءِ چڱي طرح ملايو ويو.
(3) هڪ صاف 0.2 ملي ايل پي سي آر آڪٽل ٽيوب تيار ڪريو ۽ مٿي ڏنل مخلوط رد عمل جي حل جي 15 يو ايل سان نشان لڳايو.
(4) 15 μL خالص نيوڪليڪ ايسڊ جو حل شامل ڪريو، مثبت ڪنٽرول ۽ منفي ڪنٽرول، ۽ احتياط سان آڪٽل ٽيوب ڪيپ کي ڍڪيو.
(5) چڱيءَ طرح سان ملايو، مٿي کي مٿي ڪري، ۽ ٽيوب جي تري ۾ مائع کي مرڪوز ڪرڻ لاءِ جلدي سينٽرفيوج.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) 375ul 2x بفر شامل ڪريو SARS-Cov-2 Mix((Lyophilised) ۾. ڊگھي مدت اسٽوريج.)
(2) هڪ صاف 0.2 ملي ايل پي سي آر آڪٽل ٽيوب تيار ڪريو ۽ ان کي 15μL رد عمل سان گڏ نشان لڳايو.
(3) 15μL صاف ڪيل نيوڪلڪ ايسڊ جو حل، مثبت ڪنٽرول ۽ منفي ڪنٽرول شامل ڪريو، ۽ احتياط سان آڪٽل ٽيوب ڪيپ کي ڍڪيو.
(4) چڱيءَ طرح سان ملايو، مٿي کي مٿي ڪري، ۽ ٽيوب جي تري ۾ مائع کي مرڪوز ڪرڻ لاءِ جلدي سينٽرفيوج.
3. پي سي آر amplification (مھرباني ڪري ڏسو اوزار مينوئل آپريشن سيٽنگ لاءِ.)
3. 1 پي سي آر 8-ٽيوب کي فلورسنٽ پي سي آر اوزار جي نموني چيمبر ۾ رکو، ۽ نموني کي ٽيسٽ ڪرڻ لاء مقرر ڪريو، مثبت ڪنٽرول ۽ منفي ڪنٽرول لوڊ ڪرڻ جي ترتيب جي مطابق.
3.2 فلورسنس ڳولڻ وارو چينل:
(1) ORF1ab جين FAM جي سڃاڻپ چينل کي چونڊيندو آهي (رپورٽر: FAM، Quencher: None).
(2) اين جين VIC جي سڃاڻپ چينل کي چونڊيندو آهي (رپورٽر: VIC، Quencher: None).
(3) اندروني معياري جين CY5 جي چڪاس چينل کي چونڊيندو آهي (رپورٽر: CY5، Quencher: None).
(4) غير فعال حوالو مقرر ڪيو ويو آھي ROX تي.
3.3 PCR پروگرام پيٽرولر سيٽنگ:
| قدم | گرمي پد (℃) | وقت | چڪر جو تعداد | |
| 1 | ريورس ٽرانسپشن ردعمل | 50 | 15 منٽ | 1 |
| 2 | Taq enzyme چالو ڪرڻ | 95 | 2.5 منٽ | 1 |
| 3 | Taq enzyme چالو ڪرڻ | 93 | 10 ايس | 43 |
| annealing توسيع ۽ fluorescence حصول | 55 | 30 ايس | ||
سيٽنگ کان پوء، فائل کي محفوظ ڪريو ۽ رد عمل پروگرام کي هلائي.
4.Results analysis
پروگرام ختم ٿيڻ کان پوء، نتيجا خودڪار طور تي محفوظ ڪيا ويا آهن، ۽ ايمپليفڪيشن وکر جو تجزيو ڪيو ويندو آهي. ايمپليفڪيشن وکر اوزار جي ڊفالٽ حد تائين مقرر ڪيو ويو آهي.
【Explanation of test results 】
1. تجربا جي صحيحيت جو اندازو لڳايو: مثبت ڪنٽرول FAM، VIC چينل کي هڪ عام امپليفڪيشن وکر هجڻ گهرجي، ۽ Ct قدر عام طور تي 34 کان گهٽ آهي، پر مختلف آلات جي مختلف حدن جي سيٽنگن جي ڪري ڦيرڦار ٿي سگهي ٿي. ناڪاري ڪنٽرول FAM، VIC چينل غير ايمپليلڊ Ct هجڻ گهرجي. اهو اتفاق ڪيو ويو آهي ته مٿين گهرجن کي هڪ ئي وقت تي پورو ڪرڻ گهرجي، ٻي صورت ۾ هي امتحان غلط آهي.
2. نتيجن جو فيصلو
| FAM/VIC چينل | فيصلي جو نتيجو |
| سي ٽي ج 37 | نموني امتحان مثبت آهي |
| 37≤Ct-40 | امپليڪشن وکر S-شڪل آهي، ۽ مشڪوڪ نمونن کي ٻيهر جانچڻ جي ضرورت آهي؛ جيڪڏهن ٻيهر امتحان جا نتيجا هڪجهڙا آهن، ان کي مثبت سمجهيو ويندو، ٻي صورت ۾ اهو منفي آهي |
| Ct≥40 يا ڪو به واڌارو | نموني ٽيسٽ منفي آهي (يا کٽ جي چڪاس جي هيٺين حد کان هيٺ) |
نوٽ: (1) جيڪڏهن ٻئي FAM چينل ۽ VIC چينل هڪ ئي وقت مثبت آهن، SARS-Cov-2 مثبت ٿيڻ لاءِ طئي ٿيل آهي.
(2) جيڪڏهن FAM چينل يا VIC چينل مثبت آهي ۽ ٻيو چينل منفي آهي، ٽيسٽ کي بار بار ڪيو وڃي. جيڪڏهن اهو ساڳئي وقت مثبت آهي، ان کي SARS-Cov-2 مثبت سمجهيو ويندو، ٻي صورت ۾ اهو فيصلو ڪيو ويندو SARS-Cov-2 منفي.
لاڳاپيل مصنوعات
-
COVID-19 IgM/IgG اينٽي باڊي ڊيٽيڪشن کٽ
COVID-19 IgM/IgG اينٽي باڊي ڊيٽيڪشن ڪٽ （ڪولائيڊ گولڊ اميونوڪروميٽوگرافي جو طريقو) پراڊڪٽ مينوئل 【پراڊڪٽ جو نالو】COVID- 19 IgM/IgG اينٽي باڊي ڊيٽيڪشن ڪٽ 【ڪولائيڊل گولڊ اميونوڪروميٽوگرافي جو طريقو 【اي سي پيڪنگ/1 اسپيڪنگ ٽيسٽ 【 خلاصو】 ناول ڪوروناوائرس جو تعلق β جينس سان آهي. COVID-19 هڪ شديد تنفس جي وچڙندڙ بيماري آهي. ماڻهو عام طور تي حساس آهن. هن وقت، ناول ڪوروناوائرس کان متاثر ٿيل مريض بنيادي ذريعو آهن ...
-
نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ يا صاف ڪرڻ واري کٽ
نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ يا صاف ڪرڻ واري کٽ يا ذخيرو ٿيل -20℃. نموني کي 0 ℃ ڪرلنگ استعمال ڪندي منتقل ڪيو وڃي. تعارف نيوڪلڪ ايسڊ ڪڍڻ يا صاف ڪرڻ واري کٽ (مقناطيسي موتي جو طريقو) آر اين اي ۽ ڊي اين اي جي پاڻمرادو صاف ڪرڻ لاءِ ٺهيل آهي جسم جي رطوبتن (جهڙوڪ سواب، پلازما، سيرم) پاڻمرادو نيوڪلڪ ايسڊ ڪڍڻ وارا اوزار استعمال ڪندي. مقناطيسي-ذرو ٽيڪنالاجي اعلي معيار جي ڊي اين اي / آر اين اي مهيا ڪري ٿي جيڪا مناسب آهي ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) پراڊڪٽ مينوئل 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit 【Packaging specifications】 1 Test/Kit to belong to the ACTRus. COVID-19 هڪ شديد تنفس جي وچڙندڙ بيماري آهي. ماڻهو عام طور تي حساس آهن. هن وقت، ناول ڪوروناوائرس کان متاثر ٿيل مريض اهم آهن ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) پراڊڪٽ مينوئل 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPECIFICATIONS】 1 Test/Kit,estTKit/2STKit 】 جي ناول ڪوروناوائرس جو تعلق β جينس سان آهي. COVID-19 هڪ شديد تنفس جي وچڙندڙ بيماري آهي. ماڻهو عام طور تي حساس آهن. في الحال، ناول ڪوروناوائرس کان متاثر ٿيل مريض انفيڪشن جو مکيه ذريعو آهن؛ علامتي طور تي متاثر ٿيل ماڻهو...